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如何運用加熱法提取胎牛血清白蛋白？

點擊次數(shù)：13857 發(fā)布時間：2016/11/8 9:17:25

一般提取胎牛血清白蛋白，我們常使用加熱法。在今天的技術(shù)咨詢中，上海恒遠(yuǎn)生物為您主要介紹方法步驟及所需材料。下面一起來看看如何靈活運用加熱法提取胎牛血清白蛋白？

一、所需材料

胎牛血清取近郊屠宰場，以檸檬酸三鈉為抗凝劑，血液采集后隨即分離出血漿備用。需要的試劑有血清白蛋白；溴甲酚氯；醋酸纖維素薄膜，其余試劑均為分析純。提取胎牛血清白蛋白需要準(zhǔn)備 LG-6型大容量冷凍離心機(jī)，DF-C型電泳儀，UV-754型紫外可見分光光度計，PHS-2型酸度計。

二、具體方法

白蛋白含量測定采用溴甲酚氯法，以胎牛血清白蛋白為標(biāo)準(zhǔn). 白蛋白純度的測定采用醋酸纖維素薄膜電泳法。吸光度值的測定用分光光度計直接測定蛋白質(zhì)溶液在波長為403 nm處的光吸收值，然后折算成濃度為10 g/L時牛血清白蛋白的光吸收值，用A403表示。

胎牛血清白蛋白的生產(chǎn)工藝新鮮抗凝牛血用LC-6型大容量離心機(jī)(3 000 r/min×30 min)離心分離出血漿，加一定量的蒸餾水稀釋，再加入適當(dāng)?shù)姆€(wěn)定劑和蛋白沉淀劑，然后按下述方法進(jìn)行實驗處理：

1.不同pH值溶液對白蛋白的收率和質(zhì)量的影響在其它條件固定的情況下，試驗不同pH值對白蛋白的收率、純度及A403值的影響。

2.不同加熱保溫時間對白蛋白的收率和質(zhì)量的影響在選定的pH值和其它條件固定的情況下，試驗不同加熱保溫時間對白蛋白的收率、純度及A403值的影響。

3.不同稀釋倍數(shù)對白蛋白的收率和質(zhì)量的影響在選定的pH值和保溫時間及其它條件固定的情況下，試驗不同稀釋倍數(shù)對白蛋白的收率、純度及A403值的影響。

4.不同加熱溫度對白蛋白的收率和質(zhì)量的影響在其它條件選定的情況下，試驗不同加熱溫度對白蛋白的收率、純度及A403值的影響。

歡迎您來電咨詢訂購我公司胎牛血清，上海恒遠(yuǎn)生物為您提供的血清產(chǎn)品質(zhì)量100%保證，價格優(yōu)惠，包郵送貨上門！多種規(guī)格供您選用。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

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